Mechanism of removal of senescent cells by human macrophages in situ.
-
- Mechanizmy, za pomocą których makrofagi rozróżniają „dojrzałe ja” i „starzejące się ja”, zostały zbadane przy użyciu ludzkiego układu krwinek czerwonych (RBC) jako modelu. Warunki symulujące te, które występowały in situ, przestrzegano tak ściśle, jak to możliwe, stosując techniki krótkoterminowej hodowli i inkubując z autologicznymi makrofagami i immunoglobulinami (Ig). Stwierdzono, że RBC starzone in vitro były fagocytowane, gdy były inkubowane w połączonych , normalnych ludzkich IgG , allogenicznych Ig, autologicznych IgG lub Ig, przemyte pożywką, a następnie inkubowane z autologicznymi makrofagami.
- RBC traktowane w ten sam sposób, ale inkubowane w IgM lub Iga, surowica zubożająca Ig lub sama Pożywka 199 nie były fagocytowane. Wskazuje to , że Ig jest wymagane do fagocytozy i sugeruje , że Ig , które przyłącza się do RBC to IgG . Kiedy świeżo pobrane RBC zostały podzielone na młode (Y) i stare (O) RBC w zależności od gęstości i inkubowane z autologicznymi makrofagami, mniej niż 5% Y-RBC zostało fagocytowanych, podczas gdy ponad 30% O-RBC zostało fagocytowanych , niezależnie od tego, czy końcowe inkubacje przeprowadzono w pożywce bez surowicy (Y-RBC, 5 +/- 2% fagocytowane; O-RBC, 33 +/- 1,5%), czy w autologicznej surowicy pozbawionej Ig (Y-RBC, 2 +/- 2,5%; O-RBC, 51 +/- 17% lub cała surowica (Y-RBC, 0%; O-RBC, 43 +/- 5%).
- Wskazuje to, że (1) Ig jest przyłączone in situ do starego RBC i (2), że rozpoznawanie fagocytarne nie jest hamowane przez inne składniki surowicy . Skaningowa mikroskopia elektronowa, wykorzystująca znakowane odczynniki anty – IgG , IgM i IgA, wykazała, że Y-RBC zasadniczo nie zawierały Ig na swojej powierzchni, podczas gdy stare RBC miały na swojej powierzchni IgG . Odkrycia te wskazują, że IgG przyłącza się in situ do starzejących się ludzkich krwinek czerwonych, czyniąc je podatnymi na fagocytozę przez makrofagi.
Auto- i polireaktywność IgG normalnych surowic ludzkich .
- Stosując panel własnych antygenów, autoreaktywności IgM były wyraźnie i stale wykrywane za pomocą testu immunoenzymatycznego (EIA) w surowicach 29 zdrowych osobników ludzkich . Podobnie autoreaktywności IgM w surowicach wykrywano w sposób powtarzalny za pomocą immunoblottingu, przy użyciu ekstraktów ludzkich narządów jako źródeł antygenu. W przeciwieństwie do tego, reaktywności IgG były niskie w całych surowicach, ale znacznie wzrosły po oczyszczeniu metodą chromatografii powinowactwa na białku G-Sepharose.
- Wzrosty te różniły się w zależności od preparatu IgG na inny i od jednego antygenu do drugiego (od 1 do 94 razy), co dało unikalny wzór autoreaktywności IgG dla każdego osobnika. Reaktywność IgG uległa znacznemu zmniejszeniu, gdy surowica zubożona w IgG została dodana do wyizolowanej autologicznej IgG .
- Przeciwciała IgM wyizolowane z surowicy na immunoadsorbencie F(ab’)2 IgG częściowo hamowały wiązanie IgG z tubuliną i miozyną, ale nie z aktyną. Poszczególne preparaty IgG badane oddzielnie wykazywały, ze wszystkimi autoantygenami z panelu, wyższą autoreaktywność niż te z tych samych, ale połączonych IgG , które z kolei były wyższe niż w przypadku dostępnego na rynku preparatu ludzkiego IgG otrzymanego od około 8000 zdrowych dawców i stosowany do wstrzykiwań dożylnych.
- W zależności od indywidualnej próbki IgG , 31-65% IgG wiązało się z kolumną DNP-Sepharose i wymywano DNP-glicyną. Stwierdzono, że wyizolowane przeciwciała anty-DNP są polireaktywne i mają wyższą autoreaktywność niż oryginalny preparat IgG dla wszystkich antygenów panelu.
- Podobnie, przeciwciała IgG analizowane przy użyciu procedury wymiany przeciwciał okazały się zasadniczo polireaktywne, ale zauważono również niektóre pozornie monospecyficzne przeciwciała. Wyniki te sugerują, że ogromna większość IgG obecnych u zdrowych ludzi składa się z polireaktywnych autoprzeciwciał. Autoreaktywności IgG są tylko marginalnie wyrażane w tych całych surowicach z powodu IgM – IgG , IgG – IgG i innych, wciąż niezidentyfikowanych interakcji.
Ludzkie naturalne przeciwciała cytotoksyczne dla świńskich komórek embrionalnych mózgu rozpoznają nowe ksenoantygeny nie oparte na Galalpha1,3Gal.
- Przeszczepienie świńskich embrionalnych komórek mózgowych, w tym neuronów dopaminergicznych, z śródmózgowia brzusznego (VM) jest uważane za potencjalne leczenie pacjentów z chorobą Parkinsona . W niniejszym badaniu scharakteryzowaliśmy dystrybucję wśród komórek VM głównego świńskiego ksenoantygenu śródbłonkowego, epitopu Galalpha1,3Gal, i oceniliśmy cytotoksyczny wpływ zubożonej i niezubożonej ludzkiej surowicy AB anty-Galalpha1,3Gal na komórki VM.
- Ogólne poziomy ekspresji epitopu Galalpha1,3Gal były bardzo niskie w populacji komórek VM przy użyciu barwienia lektyn Bandeiraea simplicifolia IB(4) zawieszonych komórek VM w analizach cytometrii przepływowej lub barwienia rozdzielonych SDS-PAGE, solubilizowanych białek błony komórkowej VM w badaniu Western analizy blotowe.
- Barwienie lektynowo-histochemiczne skrawków zarodkowych regionów VM świni za pomocą lektyny BSA IB(4) wykazało barwienie ograniczone do komórek śródbłonka i mikrogleju. W obecności dopełniacza, zarówno surowice AB niezubożone , jak i pozbawione przeciwciał anty-Galalpha1,3Gal okazały się cytotoksyczne dla komórek VM, co oceniono w testach cytotoksyczności opartych na mikrocytotoksyczności i cytometrii przepływowej.
- Oczyszczone IgM i IgG były cytotoksyczne w obecności dopełniacza. Trzy główne antygeny błony komórkowej VM o wielkości około 210, 105 i 50 kDa były reaktywne z naturalnymi przeciwciałami IgM obecnymi w połączonych surowicach ludzkich AB.
- Zatem cytotoksyczność zależna od przeciwciał może przyczyniać się do ksenorejekcji komórek świńskich do ludzkiego mózgu, co wymaga modyfikacji tkanki dawcy przed bardziej powszechnym wykorzystaniem heteroprzeszczepu tkanki nerwowej.
IgM swoiste dla lipopolisacharydu Vibrio cholerae jest zastępczym izotypem przeciwciała odpowiedzialnym za aktywność wibrobójczą surowicy .
- Testy przeciwciał wibriocydowych w surowicy są od dawna stosowane do oceny immunogenności szczepionek przeciwko cholerze sporządzonych z zabitych całych komórek Vibrio cholerae.
- Jednak izotypy przeciwciał odpowiedzialne za aktywność wibrobójczą surowicy nie są w pełni scharakteryzowane. W tym badaniu przebadaliśmy 20 próbek klinicznych surowicy uzyskanych od ludzi , którzy zostali zaszczepieni zabitą, pełnokomórkową szczepionką cholery i pozytywną kontrolą, ludzką surowicą rekonwalescencyjną o wysokiej aktywności wibriocydowej, aby określić, który izotyp przeciwciała jest powiązany z wibriocydem. działalność.
- Izotypy przeciwciał z połączonych surowic rekonwalescencyjnych frakcjonowano metodą chromatografii kolumnowej wykluczenia, a główną aktywność wibrobójczą wykryto we frakcji IgM .
- Zubożenie przeciwciał IgM w surowicach rekonwalescentów spowodowało znaczący (P<0,05) spadek aktywności wibriocydowej (16-krotny spadek), podczas gdy zaobserwowano tylko niewielką zmianę w przypadku zubożenia IgG lub IgA.
- Ponadto przeciwciało anty-LPS IgM wykazało najwyższą korelację z aktywnością wibrobójczą (współczynnik korelacji Spearmana r = 0,846) wśród izotypów przeciwciał przeciwko zabitemu ciepłem V. cholerae, lipopolisacharydowi (LPS) lub głównemu białku błony zewnętrznej (Omp U), podczas gdy całkowity poziom przeciwciał IgG , IgA lub IgM nie był skorelowany z aktywnością wibrobójczą w 20 próbkach ludzkiej surowicy klinicznej .
- Ponadto, ludzkie surowice rekonwalescencyjne znacząco (P<0,001) hamowały przyłączanie się V. cholerae do HT-29, ludzkiej komórki nabłonka jelitowego in vitro. Co ciekawe, surowice rekonwalescencyjne zubożone w IgM nie mogły skutecznie hamować przylegania bakterii w porównaniu z surowicami niezubożonymi (P<0,05).
- Wreszcie, adhezja bakterii była znacząco hamowana przez surowice o wysokim mianie wibriocydowym w porównaniu z surowicami o niskim mianie (P = 0,014). Wspólnie wykazaliśmy, że anty-V. IgM LPS cholery jest silnie skorelowane z aktywnością wibrobójczą surowicy i może to być zastępczy izotyp przeciwciała reprezentujący przeciwciała ochronne przeciwko V. cholerae.
Przeciwciała przeciwko kolagenowi typu II w ludzkiej surowicy : efekty przechowywania i rola antyidiotypu IgM w regulacji.
- Aby zbadać obserwację, że reaktywność IgG z ludzkim zdenaturowanym kolagenem typu II (zdenaturowanym CII) jest zwiększona w normalnej ludzkiej surowicy przechowywanej w 4 stopniach C w porównaniu z surowicą przechowywaną w -20 stopniach C.
- Reaktywność mierzono testem ELISA i oceniano również wpływ ogrzewania. Surowicę rozdzielono na kolumnach powinowactwa i przeprowadzono eksperymenty mieszania z otrzymanymi frakcjami w celu zbadania działania hamującego lub wzmacniającego.
- We frakcji zubożonej w IgG w surowicy przechowywanej w temperaturze -20 stopni C od zdrowych osób znajduje się inhibitor nietrwały w przechowywaniu i niestabilny termicznie , a inhibitor jest obecny w niektórych połączonych preparatach ludzkich IgM, co zmniejsza reaktywność przeciwciała na ludzki CII w surowicy z obu osoby zdrowe i pacjenci z reumatoidalnym zapaleniem stawów.
Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (mL)
34010-0 Pel-Freez mL 65 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (1mL)
34010-1 Pel-Freez 1mL 103.06 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (10mL)
34010-10 Pel-Freez 10mL 445.63 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (100mL)
34010-100 Pel-Freez 100mL 3871.25 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (2mL)
34010-2 Pel-Freez 2mL 141.13 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (3mL)
34010-3 Pel-Freez 3mL 179.19 EUR Human Comp IgG/IgM Depleted Pooled (5mL)
34010-5 Pel-Freez 5mL 255.31 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (mL)
34014-0 Pel-Freez mL 82.4 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (1mL)
34014-1 Pel-Freez 1mL 82.4 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (10mL)
34014-10 Pel-Freez 10mL 239 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (100mL)
34014-100 Pel-Freez 100mL 1805 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (2mL)
34014-2 Pel-Freez 2mL 99.8 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (5mL)
34014-5 Pel-Freez 5mL 152 EUR Human Serum IgG/IgM Depl Pooled (500mL)
34014-500 Pel-Freez 500mL 7677.5 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (1mL)
34021-1 Pel-Freez 1mL 78.05 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (10mL)
34021-10 Pel-Freez 10mL 195.5 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (100mL)
34021-100 Pel-Freez 100mL 1370 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (2mL)
34021-2 Pel-Freez 2mL 91.1 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (5mL)
34021-5 Pel-Freez 5mL 130.25 EUR Human Serum IgG Depl Pooled (500mL)
34021-500 Pel-Freez 500mL 6590 EUR Human serum C4-depleted
C415-DS-1 Alpha Diagnostics 1 ml 408 EUR Human serum C3-depleted
C316-DS-1 Alpha Diagnostics 1 ml 408 EUR Human Serum (CRP Depleted)
90R-105 Fitzgerald 100 ml 740 EUR Fetal Bovine Serum,IgG Depleted, < 2 ug/ml
F0720-050 GenDepot 500 ml 1198 EUR Human Complement C5 depleted serum
C5512-DS Alpha Diagnostics 1 ml 408 EUR Human Complement serum (pooled sera)
COMPH-10 Alpha Diagnostics 10 ml 408 EUR Human Complement serum (pooled sera)
COMPH-25 Alpha Diagnostics 25 ml 651 EUR Human Ferritin depleted/stripped serum (Ferritin
1810-FDS-10 Alpha Diagnostics 10 ml Ask for price Human Ferritin depleted/stripped serum (Ferritin
1810-FDS-1000 Alpha Diagnostics 1000 ml Ask for price Chimpanzee control serum, (IgG's-depleted)
NCMS-DG-1 Alpha Diagnostics 1 ml 225 EUR Human Serum Off Clot Pooled (1mL)
34019-1 Pel-Freez 1mL 141.13 EUR Monkey (Cynomolgus) control serum (IgG's-depleted)
NMCS-DG-1 Alpha Diagnostics 1 ml 225 EUR Human Sex Hormone Binding Globulin (SHBG) depleted human serum
0700-SHBG-D10 Alpha Diagnostics 10 ml 225 EUR Human Sex Hormone Binding Globulin (SHBG) depleted human serum
0700-SHBG-D1000 Alpha Diagnostics 1 L Ask for price Ibrutinib drug-Human IgG Conjugate
IBT17-IgG Alpha Diagnostics 100 ug 529 EUR Human IgG protein (Serum)
31C-CP1033U Fitzgerald 1 mg 262 EUR Human Cytomegalovirus IgG / IgM, Toxoplasma IgG / IgM, Rubella IgG Rapid Test Kit
abx092078-20tests Abbexa 20 tests 342 EUR Human C1q depleted sera
C1Q17-DS-1 Alpha Diagnostics 1 ml 408 EUR Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Hu-48T DL Develop 48T 404 EUR Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Hu-96T DL Develop 96T 518 EUR Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Hu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 411 EUR Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Hu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 565 EUR Human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0498HM-48T GenAsia Biotech 48T 289 EUR Human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0498HM-96T GenAsia Biotech 96T 466 EUR human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
201-12-0482 SunredBio 96 tests 440 EUR Human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
QY-E02273 Qayee Biotechnology 96T 361 EUR human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-03843H1 ChemNorm 96T 481 EUR human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-03843H2 ChemNorm 48T 332 EUR Human IgG & IgM Primer Set
55R-1000 Fitzgerald 2 x 16 sets 986 EUR 2019-nCoV IgG/IgM Rapid Test Cassette (Whole Blood/Serum/Plasma)
GEN-402-25tests All test 25 tests 244 EUR Zika IgM/IgG Control Pack (IgM,IgG & Negative Controls, 0.25mL)
0801020 Zeptometrix 0.25mL 102 EUR Fibrinogen (plasminogen depleted), Human Plasma
7692-1 Biovision 294 EUR Goat Anti-Mouse IgG+IgM+IgA, unlabeled IgG (for good detection of 3 isotypes) human serum adsorbed)
40325-UL Alpha Diagnostics 0.5 mg 164 EUR 2019-nCoV IgG/IgM RapiCard InstaTest for Whole Blood/Serum/Plasma samples
GEN-176552-25tests Cortez Diagnostic 25 tests 276 EUR 2019-nCoV IgG/IgM RapiCard InstaTest for Whole Blood/Serum/Plasma samples
GEN-176552-50tests Cortez Diagnostic 50 tests 472 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0219MS-48T GenAsia Biotech 48T 336 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0219MS-96T GenAsia Biotech 96T 534 EUR Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0449RT-48T GenAsia Biotech 48T 317 EUR Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
GA-E0449RT-96T GenAsia Biotech 96T 496 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM (PI Ab IgG/IgM) ELISA Kit
abx254346-96tests Abbexa 96 tests 754 EUR Rat Phosphatidylinositol Antibody IgG/IgM (PI Ab IgG/IgM) ELISA Kit
abx353833-96tests Abbexa 96 tests 786 EUR Mouse Phosphatidylinositol antibody IgG/IgM (PI Ab IgG/IgM) CLIA Kit
abx197438-96tests Abbexa 96 tests 825 EUR Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
QY-E11203 Qayee Biotechnology 96T 413 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit
QY-E21158 Qayee Biotechnology 96T 361 EUR Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-01999R1 ChemNorm 96T 492 EUR Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-01999R2 ChemNorm 48T 341 EUR PI Ab-IgG/IgM/ Rat PI Ab- IgG/ IgM ELISA Kit
ELA-E0315r Lifescience Market 96 Tests 886 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-02867M1 ChemNorm 96T 489 EUR Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
CN-02867M2 ChemNorm 48T 338 EUR Goat anti Human IgG + IgA + IgM
41R-1039 Fitzgerald 2 mg 138 EUR Goat anti Human IgG + IgA + IgM
41R-1040 Fitzgerald 1 mg 144 EUR Goat anti Human IgG + IgA + IgM
20-S2103GND1-D0 Fitzgerald 10 ml 116 EUR Bovine IgM, purified (non-immune, serum)
20001-2-1 Alpha Diagnostics 0.5 mg 225 EUR Mouse (non-immune) Serum IgM, purified
20008-2 Alpha Diagnostics 100 ug 141 EUR Chicken (non-immune) Serum IgM, purified
20010-2-1 Alpha Diagnostics 0.5 mg 225 EUR Goat (non-immune) Serum IgM, purified
20011-2-1 Alpha Diagnostics 0.5 mg 225 EUR Dog (non-immune) Serum IgM, purified
20016-2-1 Alpha Diagnostics 0.5 mg 225 EUR Rabbit (non-immune) Serum IgM purified
20039-100 Alpha Diagnostics 100 ug 164 EUR Rabbit (non-immune) Serum IgM purified
20039-1000 Alpha Diagnostics 1000 ug 529 EUR Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-b-48T DL Develop 48T 456 EUR Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-b-96T DL Develop 96T 590 EUR Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Ch-48T DL Develop 48T 426 EUR Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Ch-96T DL Develop 96T 549 EUR Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Mu-48T DL Develop 48T 411 EUR Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Mu-96T DL Develop 96T 528 EUR Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Ra-48T DL Develop 48T 426 EUR Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Ra-96T DL Develop 96T 549 EUR Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Rb-48T DL Develop 48T 508 EUR Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
DLR-IgM-Rb-96T DL Develop 96T 661 EUR Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 473 EUR Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-b-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 654 EUR Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Ch-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 437 EUR Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Ch-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 603 EUR Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Mu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 419 EUR Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Mu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 578 EUR Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Ra-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 437 EUR Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Ra-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 603 EUR Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Rb-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 534 EUR Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RDR-IgM-Rb-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 742 EUR Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit
RD-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 453 EUR Warunki przechowywania i ciepło znacząco wpływają na przeciwciała IgG przeciwko zdenaturowanemu CII, ale nie na przeciwciała przeciwko innym antygenom. W tych efektach może pośredniczyć obecność antyidiotypu IgM przeciwko przeciwciału IgG przeciwko zdenaturowanemu CII