Zaburzające naczynia naczyniowe skutki elektroporacji i elektrochemioterapii
Pawel
- 0
-
- lektrochemioterapia ma bezpośredni wpływ cytotoksyczny na komórki nowotworowe i przypuszczalnie ma działanie uszkadzające naczynia. W tym badaniu, na podstawie przewidywania modelu matematycznego, przeprowadzono ocenę histologiczną i pomiary fizjologiczne guzów w celu potwierdzenia, że elektroporacja i elektrochemioterapia guzów mają działanie uszkadzające naczynia. W badaniu lite guzy podskórnego mięsaka SA-1 u myszy A/J leczono bleomycyną (BLM) podawaną dożylnie (1 mg kg(-1)), stosując impulsy elektryczne (8 impulsów, 1040 V, 100 mikronów, 1 Hz) lub połączenie obu – elektrochemioterapia.
- Efekt naczyniowy określono za pomocą laserowej przepływomierzy Dopplera, ultrasonografii dopplera mocy i barwienia błękitem patentowym. Stopień niedotlenienia guza określono immunohistochemicznie za pomocą markera hipoksji pimonidazolu i ciśnienia parcjalnego tlenu (pO(2)) w guzach za pomocą oksymetrii elektronowego rezonansu paramagnetycznego.
- Elektrochemioterapia z BLM wywołała dobry efekt przeciwnowotworowy w ciągu 22 dni, opóźnienie wzrostu guza i 38% wyleczenie guza. Zastosowanie impulsów elektrycznych do guzów wywołało natychmiastowe , ale przemijające zmniejszenie przepływu krwi przez guz (o 70%), które odzyskano w ciągu 24 godzin. Podczas tego zmniejszenia przepływu krwi przez guz stwierdziliśmy wzrost hipoksji obszaru guza do 30%, co znalazło również odzwierciedlenie w zmniejszeniu utlenowania guza (o 70%).
- Zgodnie z opisanym modelem matematycznym komórki śródbłonka wyścielające naczynia krwionośne guza są eksponowane na około 40% wyższe pole elektryczne niż otaczające komórki guza, a zatem łatwo poddają się elektroporacji, umożliwiając dostęp do cytozolu o wysokim stężeniu BLM.
- W związku z tym elektrochemioterapia oprócz natychmiastowego działania uszkadzającego naczynia ma również działanie opóźnione (po 24 h), w wyniku obrzęku komórek śródbłonka i apoptozy objawiającej się rozległą martwicą guza, niedotlenieniem guza, przedłużoną redukcją przepływu krwi przez guz i znacznym wzrostem guza opóźnienie i wyleczenia guza.
- Nasze wyniki pokazują, że oprócz dobrze ugruntowanego bezpośredniego działania cytotoksycznego na komórki nowotworowe, elektrochemioterapia ma również pośrednie działanie uszkadzające naczynia krwionośne, co prowadzi do rozległej martwicy komórek nowotworowych prowadzącej do całkowitej regresji guzów.
Dowody na prysznice mutacji.
- Mutanty w systemie myszy transgenicznych Big Blue wykazują spontaniczne skupienia wielokrotnych mutacji o nieoczekiwanie wysokiej częstotliwości, zgodnej ze zdarzeniami chronokoordynacyjnymi.
- Przetestowaliśmy przewidywanie, że wielokrotne mutacje obserwowane w docelowej mutacji lacI czasami występują w kontekście wielokrotnych mutacji chronokoordynacyjnych obejmujących wiele kilozasad (strumyki mutacji).
- Dodatkowe sekwencjonowanie mutantów przeprowadzono w regionach bezpośrednio flankujących region lacI (łącznie 10,7 kb).
- Dziewiętnaście dodatkowych mutacji znaleziono poza regionem lacl („ektomutacje”) z 10 mutantów zawierających dwie lub więcej mutacji lacl, podczas gdy tylko jedną ektomutację znaleziono w 130 mutacjach z pojedynczą mutacją (P <0,0001).
- Prysznice mutacji miały średnio około jednej mutacji na 3 kb. Cztery mutanty wykazały blisko rozmieszczone podwójne mutacje w nowej sekwencji, a analiza odstępów między tymi mutacjami ujawniła znaczne skupienia (P = 0,0098).
- Aby określić zasięg strumieni mutacji, zsekwencjonowano regiony (łącznie 8,5 kb) odległe od regionu lacI (w odległości około 16-17 kb). W tych odległych regionach znaleziono tylko dwie dodatkowe ektomutacje, co jest zgodne z prysznicami mutacji, które generalnie nie rozciągają się na więcej niż około 30 kb.
- Dochodzimy do wniosku, że prysznice mutacji istnieją i stanowią co najmniej 0,2%, a prawdopodobnie 1% lub więcej zdarzeń mutacyjnych obserwowanych w tym systemie. Istnienie strumieni mutacji ma implikacje dla onkogenezy i ewolucji, zwiększając możliwości „raku w jednej chwili ” i „intronów jako gąbek w celu zmniejszenia szkodliwego wpływu strumieni mutacji”.
W mazi stawowej w ostrej fazie urazu stawu kolanowego (hemarthrosis) obserwuje się podwyższenie markerów chrząstki i kości oraz cytokin zapalnych – analiza przekrojowa.
- Celem tego badania przekrojowego było zbadanie stężeń markerów chrząstki i kości oraz prozapalnych cytokin w płynie maziowym (SF) pobranym w różnych punktach czasowych z ostrych kontuzji kolan z hemarthrosis i porównanie ich ze stężeniami SF w kolanach osób zdrowych, dobranych pod względem wieku i płci.
- SF odessano z ostrego urazu kolana u 111 osób (średni wiek 27 lat, rozpiętość 13-64 lata, 22% kobiet). Stężenia siarczanowanych glikozaminoglikanów (sGAG) mierzono za pomocą wytrącania błękitem Alcian , podczas gdy chrząstka ARGS, biomarkery kości [osteokalcyna (OCL), wydzielane białko o kwasowym i bogatym w cysteinę (SPARC) i osteopontynę (OPN)] oraz prozapalne cytokiny [interleukina (IL) )-1β, IL-6, IL-8 i czynnik martwicy nowotworu (TNF)-α] analizowano metodą elektrochemiluminescencji. Próbki analizowano również pod kątem czasu między urazem a aspiracją [ten sam dzień (n = 29), 1 dzień (n = 31), 2-3 dni (n = 19), 4-7 dni (n = 20) i 8 -23 dni (n = 12)].
- Stężenia SF ARGS (P < 0,001), SPARC (P < 0,001), OPN (P < 0,001) i wszystkich cytokin (P < 0,001), ale nie sGAG (P = 0,06) lub OCL (P = 0,992) istotnie wyższy w uszkodzonych kolanach w porównaniu z kolanami osób referencyjnych. Markery chrząstki sGAG i ARGS były istotnie wyższe w kolanach aspirowanych później niż 1 dzień po urazie, podczas gdy stężenia SPARC i OPN oraz wszystkich cytokin były wyższe w kolanach aspirowanych tego samego dnia co uraz i we wszystkich późniejszych punktach czasowych.
- Nasze wyniki sugerują, że ostre uszkodzenie kolana wiąże się z natychmiastową lokalną reakcją biochemiczną na uraz, która może wpływać na chrząstki i kości, a także na aktywność zapalną.
Magnetoelektroporacja: ulepszone znakowanie nerwowych komórek macierzystych i leukocytów do obrazowania komórkowego rezonansu magnetycznego przy użyciu jednego środka zatwierdzonego przez FDA.
- Obrazowanie metodą komórkowego rezonansu magnetycznego (MRI) opiera się na zastosowaniu wewnątrzkomórkowych środków kontrastowych, głównie związków tlenku żelaza. Zastosowano kilka technik, aby skutecznie przenosić tlenki żelaza do komórek niefagocytujących, ale wszystkie dotychczas stosowane metody wymagają przedłużonej inkubacji komórek. Postawiliśmy hipotezę, że natychmiastowe znakowanie magnetyczne komórek można osiągnąć za pomocą elektroporacji.
- Nerwowe komórki macierzyste (NSC) i leukocyty ze śledziony i węzłów chłonnych zawieszono w roztworze znakującym tlenkiem żelaza, załadowano do kuwet i poddano elektromechanicznej permeabilizacji za pomocą elektroporacji.
- Komórki znakowane magnetycznie badano pod kątem wydajności znakowania, a także potencjalnej toksyczności lub zmienionej funkcji. Aby potwierdzić przydatność metody do wykrywania komórek, przeprowadzono eksperymenty MRI przy 11,7 T. Magnetoelektroporacja NSC, jak wykazano za pomocą barwienia błękitem pruskim , barwienia immunologicznego antydekstranem i ilościowego testu wychwytu żelaza, okazała się skuteczną metodą wewnątrzkomórkowego znakowania magnetycznego.
- Leukocyty, w tym limfocyty, które są notorycznie trudne do znakowania ze względu na ich właściwości błony i małą objętość cytoplazmy, również wykazywały wyraźny wychwyt ferumoksydu.
InstantBlue 1L (Instant Blue) |
|||
ISB1L | Expedeon | 1L bottle | 198 EUR |
1L ProtoStain Blue |
|||
NAT1112 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 118.56 EUR |
OPTIONAL BLUE FILTER (497NM) |
|||
GDBL-BLUE | CORNING | 1/pk | 1298.4 EUR |
conversion screen uv/blue |
|||
VLFC26-BLUE | Consort | ea | 727.2 EUR |
SDS-Blue™ - Coomassie based solution for protein staining in SDS-PAGE |
|||
04-GSB | Gentaur Genprice |
|
|
Corning Reagent Bottle 1L PP |
|||
1500P-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK10 | 118.56 EUR |
Ice pan mini 1L blue |
|||
432116 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 82.08 EUR |
Flystuff (66-117) Nutri-fly Instant Makes 1L |
|||
FLY1188 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 33.06 EUR |
BEAKER,1L,PLASTIC,LOW FORM,PP,6/6 |
|||
1000P-1L | CORNING | 6/pk | 75.6 EUR |
BEAKER,1L,PLASTIC,LOW FORM,PFA,1/6 |
|||
1003P-1L | CORNING | 1/pk | 783.6 EUR |
BEAKER,1L,WITH HANDLE AND SPOUT,PP,12/12 |
|||
1015P-1L | CORNING | 12/pk | 139.2 EUR |
Diss Media Conc Hydrochloric Acid 0.01N (1L to 40L) |
|||
DBC10-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Diss Media Conc Hydrochloric Acid 0.1N (1L to 40L) |
|||
DBC11-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Methylene Blue solution, 0.5% in water |
|||
GT8594-1L | Glentham Life Sciences | 1 l | 60 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 6.0 (1L to 40L) |
|||
DBC02-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 7.2 (1L to 40L) |
|||
DBC04-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 7.5 (1L to 40L) |
|||
DBC05-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Diss Media Conc Na Lauryl Sulphate 0.50% (1L to 20L) |
|||
DBC07-1L | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 82.08 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 8.0 (1L to 40L) |
|||
DBC42-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
SLS pH Buffer Coloured Blue pH10 1L |
|||
PHB1304 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 31.81 EUR |
SLS pH Buffer Coloured Blue pH10 1L |
|||
PHB1314 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 39.9 EUR |
One-Step Blue Protein Gel Stain, 1X |
|||
21003-1L | Biotium | 1L | 178.8 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 4.5 (1L of to 40L) |
|||
DBC40-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
Diss Media Conc K Phosph pH 7.1 (1L of to 40L) |
|||
DBC41-1L | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 449.16 EUR |
CYLINDER,GRAD,1L,PLASTIC,SINGLE METRIC SCALE,PP,TC W/FUNNEL,1/6 |
|||
3022P-1L | CORNING | 1/pk | 193.2 EUR |
VOL FLASK,1L,PLASTIC,CLASS A,PMP,24/29 TAPERED PP STOPPER,1/3 |
|||
5640P-1L | CORNING | 1/pk | 159.6 EUR |
VOL FLASK,1L,PLASTIC,CLASS B,PP,24/29 TAPERED PP STOPPER,1/3 |
|||
5641P-1L | CORNING | 1/pk | 145.2 EUR |
1L Hanna pH 6.86 buffer 1L |
|||
HI70061L | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 29.64 EUR |
1L HarrisHematoxylin |
|||
NAT1338 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 100.32 EUR |
1L Autofluor |
|||
NAT1446 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 223.44 EUR |
Sharpsbin 1L |
|||
SAF7352 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 3.42 EUR |
Percoll 1L |
|||
17089101 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 425.22 EUR |
Beaker Brushes, 1L |
|||
BR007-1K | Bio Basic | 1 UNIT | 64.18 EUR |
SLINGSHOT-1L Antibody |
|||
48407-100ul | SAB | 100ul | 399.6 EUR |
SLINGSHOT-1L Antibody |
|||
48407-50ul | SAB | 50ul | 286.8 EUR |
SLINGSHOT-1L Antibody |
|||
abx016133-100ug | Abbexa | 100 ug | 493.2 EUR |
SLINGSHOT-1L Antibody |
|||
abx224128-100ug | Abbexa | 100 ug | 493.2 EUR |
1L-chiro-Inositol |
|||
GC7626-100MG | Glentham Life Sciences | 100 mg | 122.4 EUR |
1L-chiro-Inositol |
|||
GC7626-1G | Glentham Life Sciences | 1 g | 322.8 EUR |
Dermcidin-1L (human) |
|||
H-7316.0500 | Bachem | 0.5mg | 212.4 EUR |
Dermcidin-1L (human) |
|||
H-7316.1000 | Bachem | 1.0mg | 352.8 EUR |
1L Flask Clamp |
|||
MIX1332 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 30.78 EUR |
1L Tween 20 |
|||
NAT1084 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 124.26 EUR |
1L ProtoBlue Safe |
|||
NAT1108 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 112.86 EUR |
1L AcrylaGel 30% |
|||
NAT1118 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 133.38 EUR |
1L SequaGel XR |
|||
NAT1162 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 119.7 EUR |
1L TBE 10X |
|||
NAT1196 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 44 EUR |
1L TBE 5X |
|||
NAT1200 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 36.82 EUR |
1L Denaturation Solution |
|||
NAT1232 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 48.79 EUR |
1L Neutralization Solution |
|||
NAT1234 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 48.79 EUR |
1L ProtoGel (30%) |
|||
NAT1260 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 135.66 EUR |
1L ProtoGel (40%) |
|||
NAT1264 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 161.88 EUR |
1L Scotts Tapwater |
|||
NAT1342 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 34.54 EUR |
1L Oxosol 306 |
|||
NAT1382 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 86.64 EUR |
Flask Receiving 1L |
|||
EVA5012 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 204.06 EUR |
Arsenite 0.05M 1L |
|||
SA2005F | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 101.46 EUR |
Stainless Container 1L |
|||
SAM1111 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 263.34 EUR |
Scoop 1L Polypropylene |
|||
SCO1016 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 28.16 EUR |
GL45 Flask - 1L |
|||
FLA1006 | Scientific Laboratory Supplies | PK10 | 241.68 EUR |
Flask Filter 1L |
|||
FLA7724 | Scientific Laboratory Supplies | PK5 | 282.12 EUR |
Beaker 1L SSteel |
|||
BEA3328 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 104.88 EUR |
Percoll Plus 1L |
|||
17544501 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 641.82 EUR |
Hellmanexcleaning concentrate 1l |
|||
CEL2106 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 79.8 EUR |
Dosing Bottle 1L |
|||
CLE2020 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 8.16 EUR |
Sepharose 6B 1L |
|||
17011001 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 918.84 EUR |
Sepharose 4B 1L |
|||
17012001 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 918.84 EUR |
Growth Medium 1L |
|||
79555 | BPS Bioscience | 500 ml | 650 EUR |
Instant Lentivirus Detection Card |
|||
K1470-10 | Biovision | 10 tests | 454.8 EUR |
Instant Lentivirus Detection Card |
|||
K1470-20 | Biovision | 20 tests | 636 EUR |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE107-10VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE107-80VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE108-10VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE108-80VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE109-10VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
ECOS Blue (XL1-Blue |
|||
FYE109-80VL | Yeastern Biotech | 100 µl x 10 vials | Ask for price |
SLINGSHOT-1L Conjugated Antibody |
|||
C48407 | SAB | 100ul | 476.4 EUR |
CELL EXPANSION BAG, 1L |
|||
91-200-85 | CORNING | 1/pk | 134.4 EUR |
Kartell Jug 1L PP |
|||
JUG1002 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 9.12 EUR |
Jug StSteel 1L Graduated |
|||
JUG2002 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 42.18 EUR |
1L DEPC Treated Water |
|||
NAT1104 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 69.54 EUR |
1L Bis-AcrylaGel 2% |
|||
NAT1122 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 60.42 EUR |
1L SequaGel UreaGel Concentrate |
|||
NAT1134 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 109.44 EUR |
1L SequaGel UreaGel-6 |
|||
NAT1146 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 103.74 EUR |
1L SequaGel UreaGel-8 |
|||
NAT1150 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 103.74 EUR |
1L SequaGel UreaGel Diluent |
|||
NAT1154 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 49.93 EUR |
1L TAE Buffer 50X |
|||
NAT1222 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 101.46 EUR |
1L SSC Buffer 20X |
|||
NAT1224 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 44 EUR |
1L ProtoGel Resolving Buffer |
|||
NAT1268 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 78.66 EUR |
1L EDTA 0.5M Solution |
|||
NAT1282 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 140.22 EUR |
Rotating Flask 1L Quickfit |
|||
QFD1L4RE | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 59.91 EUR |
Bibby 1L Heating Mantle |
|||
HEA6508 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 479.94 EUR |
Ice pan 1L square |
|||
HOM2736 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 307.8 EUR |
Electrode Storage Soln 1l |
|||
ESS01 | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 107.16 EUR |
Nalgene MF75 Receiver 1L |
|||
FIL8026 | Scientific Laboratory Supplies | PK12 | 167.58 EUR |
1L Sodium Hydroxide Solution |
|||
S25001SP | Scientific Laboratory Supplies | 1L | 49.02 EUR |
GL45 Baffled Flask - 1L |
|||
FLA1016 | Scientific Laboratory Supplies | PK10 | 259.92 EUR |
Simax Buchner Flask 1L |
|||
FLA38040 | Scientific Laboratory Supplies | PK8 | 471.96 EUR |
Erlenmeyer Flask Narrow 1L |
|||
FLA40100 | Scientific Laboratory Supplies | PK10 | 66.12 EUR |
Baffled 1L Erlenmeyer Flask |
|||
FLA4196 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 57.47 EUR |
Nalgene 1L Flask Disposable |
|||
FLA7116 | Scientific Laboratory Supplies | PK6 | 92.34 EUR |
×
Eksperymenty MRI wykazały, że znakowane NSC można wizualizować jako pojedyncze komórki i skupiska komórek w fantomach żelatynowych oraz jako proliferujące masy komórkowe w mózgu myszy. Opracowaliśmy wygodną technikę błyskawicznego magnetycznego znakowania komórek. Ponieważ magnetoelektroporacja pozwala na stosowanie tlenków ferumowych zatwierdzonych przez amerykańską Agencję ds. Żywności i Leków bez dodatkowych środków, ma doskonały potencjał do translacji klinicznej.
Tagi: instant instant cart delivery instant checkmate instant checkmate login instant gaming instant ink instant ink login instant messenger instant pot air fryer instant pot beef stew instant pot chicken recipes instant pot corned beef instant pot corned beef and cabbage instant pot hard boiled eggs instant pot mashed potatoes instant pot pork chops instant pot pot roast instant pot recipes instant pot rice instant street view instantaneous instantgaming.com instantiation instantink.com